尼康显微镜的操作指导一看即会!
尼康显微镜操作之前,用荧光显微镜的荧光观察功能需提前填写预约记录,使用后填写使用记录。普通观察切片和细胞无需登记(只有荧光观察或荧光拍照才需要打开汞灯,明场、相差图像和观察细胞不需要打开汞灯)。填写预约记录是为避免频繁开、关汞灯,延长汞灯寿命,当操作者看到有人预约在自己后面时间不长时,可以不用关汞灯(汞灯打开后40分钟后才能关:汞灯关闭后无论多急,40分钟后才能开)。
彩色相机的开机:
1.先确认电源连接正常,打开外置灯箱电源控制器开关;
2.打开机身底座左侧白色(正方形)卤素灯开关,通过调节机身左侧开关下方的旋钮控制灯泡亮度确认显微镜处于工作状态。把透射照明器中的“NCB11滤色片”和“D滤色片”插入光路中以保证色彩真实。
明场图像观察:
1.先把显微镜的物镜转盘转到低倍物镜档位,把准备观察的切片(切片的方向应是盖玻片朝下)放到显微镜载物台上;
2.聚光镜的选择:
①聚光镜对应空白挡位A;
②聚光镜孔径光栏:将聚光镜的孔径值设定在物镜数值,孔径值的60%-80%之间即可。
3.通过目镜观察调节显微镜视野内的亮度,达到z佳位置图像清晰;
4.将显微镜机座右侧的分光旋钮旋到“L”(相机端口)的位置上,通过计算机进行图像采集保存。
相差图像观察:
1.先把显微镜的物镜转盘转到低倍物镜档位,把准备观察的样本放到显微镜载物台上;
2.聚光镜的选择:
①聚光镜根据物镜选择对应的相差环(4倍物镜对应PHL,10倍、20倍物镜对应PH1,40倍物镜对应PH2);
②可根据物镜倍数的提升结合镜下效果来调整聚光镜上的孔径光阑的数值。
3.通过目镜观察调节显微镜视野内的亮度,达到z佳位置图像清晰。20,40倍物镜上有较正环,可配合使用获得清晰图像;
4.将显微镜机座右侧的分光旋钮旋到“L”(相机端口)的位置上,通过计算机进行图像采集保存。
荧光图像观察(黑白相机):
1.打开外置荧光电源控制器开关,使汞灯开始工作;
2.通过明场的卤素灯照明状态下找到样本的焦点平面,关闭卤素灯开关或把聚光镜对准C暗档,选择相应的荧光滤色镜,荧光光闸推“O”的状态;
UV:紫外,Ex:330-380nm;Em:>420nm.
G:红色,观察绿色荧光,Ex:515-565nm;Em:595-705nm.
B:蓝色,观察绿色荧光,Ex:465-495nm;Em:515-555nm.
3.通过目镜观察微调节显微镜视野内的清晰度并找寻z佳位置;
4.将显微镜机座右侧的分光旋钮旋到“R”(相机端口)的位置上,通过计算机进行图像采集保存。